細(xì)胞培養(yǎng)基是細(xì)胞培養(yǎng)好壞的重要決定因素。近二十年來，無血清培養(yǎng)基越來越受到重視。它不含動(dòng)物血清或其他生物提取液，仍可使細(xì)胞在體外較長(zhǎng)時(shí)間生長(zhǎng)、增殖或維持。它繼天然培養(yǎng)基、合成培養(yǎng)基之后發(fā)展而來，尤其應(yīng)用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的大規(guī)模工業(yè)培養(yǎng)。同時(shí)，它也是研究細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖、分化及基因表達(dá)調(diào)控的有力工具。

常規(guī)培養(yǎng)基在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中添加了一定量的血清或組織提取物，它存在以下優(yōu)缺點(diǎn)：

優(yōu)點(diǎn)：

(1)血清作為天然培養(yǎng)基，含有豐富全面的細(xì)胞生長(zhǎng)必需的營養(yǎng)，具有極為重要的功能。

(2)提供維持細(xì)胞指數(shù)生長(zhǎng)的激素、生長(zhǎng)因子以及一些低分子營養(yǎng)物。

(3)提供的結(jié)合蛋白，能識(shí)別維生素、脂類、金屬和其他激素等，調(diào)節(jié)其活性。

(4)提供的結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合，起到解毒作用。

(5)是細(xì)胞貼壁、鋪展所需的因子來源。

缺點(diǎn):

(1)血清有時(shí)含有細(xì)胞生長(zhǎng)抑制因子和毒性因子，存在潛在毒性。

(2)血清獲取成本高，價(jià)格較貴。

(3)血清由于成分不太明確，，給細(xì)胞培養(yǎng)的標(biāo)準(zhǔn)化帶來困難，同時(shí)也給細(xì)胞表達(dá)的目的產(chǎn)物純化帶來困難。

由于常規(guī)培養(yǎng)基存在的上述問題，無血清細(xì)胞培養(yǎng)基的開發(fā)和應(yīng)用漸成趨勢(shì)。無血清培養(yǎng)可在很大程度上可以避免血清所帶來的不利，但它同時(shí)也有一些不足。其優(yōu)缺點(diǎn)具體如下：

優(yōu)點(diǎn)：

(1) 其組成明確，可避免血清不同批次帶來的質(zhì)量變動(dòng)，提高可重復(fù)性。

(2)避免血清對(duì)細(xì)胞的毒性作用和血清源性污染風(fēng)險(xiǎn)。

(3)避免血清不明組分對(duì)實(shí)驗(yàn)研究的影響。

(4)有利于體外培養(yǎng)細(xì)胞的分化。

(5)可提高細(xì)胞產(chǎn)物的表達(dá)水平并易于純化。

缺點(diǎn):

(1)細(xì)胞在無血清培養(yǎng)基中易受某些機(jī)械和化學(xué)因素的影響，培養(yǎng)基的保存和應(yīng)用不如傳統(tǒng)的合成培養(yǎng)基方便。

(2)成本較高。

(3)針對(duì)性很強(qiáng)，一種無血清培養(yǎng)基僅適合某一類細(xì)胞的培養(yǎng)。

(4)無血清培養(yǎng)基由于營養(yǎng)不如血清全面，可能存在潛在的營養(yǎng)不足。

締一生物為您介紹一款可用于Vero細(xì)胞無血清培養(yǎng)[1]的SFRE199培養(yǎng)基。它可作為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，再添加其他成分后可用于Vero細(xì)胞的無血清培養(yǎng)。它對(duì)傳統(tǒng)培養(yǎng)基M199進(jìn)行了改良，開始是用于狒狒原代腎細(xì)胞的培養(yǎng)，由生物公司HiMedia公司生產(chǎn)。

SFRE-199系列將M199配方中的部分成分進(jìn)行了調(diào)整：精氨酸增至150mg/L，半胱氨酸增至4mg/L，胱氨酸增至40mg/L，谷氨酰胺增至300mg/L，谷氨酸增至75mg/L，甘氨酸增至100mg/l，組氨酸增至40mg/L，酪氨酸增至80mg/L，以獲得較好的細(xì)胞生長(zhǎng)而未表現(xiàn)出毒性。

SFRE199-1和SFRE199-2二者均含有L-谷氨酰胺、半乳糖和葡萄糖。SFRE M199-2（貨號(hào)AT090）含有Earle's鹽，而SFRE M199-1含有Hank鹽。兩種鹽的主要差別在于碳酸氫鈉的水平, 碳酸氫鈉在Eagles (2.2g/L)比在Hanks (0.35g/L) 中高。選用哪種取決于培養(yǎng)環(huán)境中的CO2濃度。

參考文獻(xiàn)

[1] Jack Litwin.The growth of Vero cells in suspension as cell-aggregates in serum-free media. State Bacteriology Laboratory, 105 21 Stockholm, Sweden.

締一生物作為HiMedia公司在中國的代理商，在細(xì)胞培養(yǎng)、微生物培養(yǎng)和檢測(cè)領(lǐng)域，一如既往地為您帶來的服務(wù)。