国产免费观看久久黄av片,亚洲人成网站观看在线播放 ,精品一区二区三区四区五区六区,国产农村妇女毛片精品久久

當(dāng)前位置:首頁  >  技術(shù)文章  >  你知道細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟都有哪幾步嗎?

你知道細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟都有哪幾步嗎?

更新時(shí)間:2022-07-22  |  點(diǎn)擊率:785

細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)指的是細(xì)胞在體外條件下的生長(zhǎng),在培養(yǎng)的過程中細(xì)胞不再形成組織(動(dòng)物)。培養(yǎng)物是單個(gè)細(xì)胞或細(xì)胞群。細(xì)胞在培養(yǎng)時(shí)都要生活在人工環(huán)境中,由于環(huán)境的改變,細(xì)胞的移動(dòng)或受一些其他因素的影響,培養(yǎng)時(shí)間加長(zhǎng),傳代導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)單一化型。

一、細(xì)胞復(fù)蘇

將凍存細(xì)2113胞從液氮5261中取出后,在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動(dòng)促進(jìn)其融4102化。移人15ml離心管中,加入10ml預(yù)熱1653的DMEM*培養(yǎng)基,輕輕吹勻,離心,2000rpmX2min,棄上清液。

加入10mlDMEM培養(yǎng)基清洗,棄上清液。加入10mlDMEM*培養(yǎng)基,輕輕吹打,接種于10cm盤中,在含5%CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

二、細(xì)胞傳代

細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時(shí).去培養(yǎng)基,10mlPBS清洗2次。加入3ml含0.25%EDTA的胰蛋白酶,放人細(xì)胞培養(yǎng)箱3min。加人1mlDMEM*培養(yǎng)基終止胰酶消化,轉(zhuǎn)移至15ml離心管。

加入10mlPBS清洗細(xì)胞培養(yǎng)盤,轉(zhuǎn)移至15ml離心管,2000rpmX2min,棄上清液。再加入10mlPBS(經(jīng)高壓滅菌,保存于40C),吹勻,吸取10微升進(jìn)行計(jì)數(shù),按照1×106/盤接種,在含5%CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。

三、細(xì)胞凍存

細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時(shí),去培養(yǎng)基,10mlPBS清洗2次。加入3ml含0.25%EDTA的胰蛋白酶,放人細(xì)胞培養(yǎng)箱3min。加入lmlDMEM*培養(yǎng)基終止胰酶消化,轉(zhuǎn)移至15ml離心管。加入10mlPBS清洗細(xì)胞培養(yǎng)盤,轉(zhuǎn)移至15ml離心管,2000rpmX2min,棄上清液。

加入lml凍存液(90%血清,10%DMSO),放入凍存盒內(nèi)(盒內(nèi)有異丙醇,以保證溫度降低的速度),立即放入一80℃冰箱內(nèi),過夜,第二天放入液氮中,可以保存至少兩年,如不放人液氮,可以保存三個(gè)月。

凍存液的配制:70%的*培養(yǎng)基+20%FBS+10%DMSO.DMSO要慢慢滴加,邊滴邊搖。


科研實(shí)驗(yàn)中,細(xì)胞的體外培養(yǎng)一直是一個(gè)重要環(huán)節(jié)。細(xì)胞要養(yǎng)好,就要用好血清,如Ausbian®特級(jí)胎牛血清,它適合各種細(xì)胞培養(yǎng),尤其適合難養(yǎng)細(xì)胞,如:干細(xì)胞、肝細(xì)胞,神經(jīng)細(xì)胞,原代培養(yǎng)、細(xì)胞融合、轉(zhuǎn)染細(xì)胞等。


国产乱人对白a片麻豆| 天天躁日日躁狠狠躁人妻| 性做久久久久久久久| 亚洲欧洲无卡二区视頻| 久久国产欧美国日产综合抖音 | 久久性爱视频| 无码AV专区丝袜专区| 国产成人av在线影院| 国产精品宾馆在线精品酒店| 国产性色强伦免费视频| 曰批免费视频播放免费| 办公室浪荡女秘在线观看| 亚洲尺码与欧洲尺码区别入口跳转 | 韩国三级hd中文字幕| 久久精品亚洲av无码四区| 熟女人妇 成熟妇女系列视频| 亚洲一区 日韩精品 中文字幕| 久久综合亚洲鲁鲁五月天 | 日韩a∨精品日韩在线观看| 中文乱幕日产无线码| 亚洲婷婷五月综合狠狠爱 | 久久综合九色欧美综合狠狠| 香港经典a毛片免费观看| 人妻无码视频一区二区三区| 中文字幕人妻av一区二区| 少妇人妻偷人精品无码视频 | 99久久99久久精品免费看蜜桃| 国产伦人人人人人人性| 亚洲av中文无码乱人伦在线观看 | 宝宝好涨水快流出来免费视频| 国产在线精品一区二区| 天堂av无码大芭蕉伊人av不卡| 久久99精品国产麻豆蜜芽| 亚洲精品无码成人| 国产亚洲精品久久久999蜜臀| 精品国产一区二区三区av| 人妻少妇av无码一区二区| 裸身美女无遮挡永久免费视频| 中文字幕日韩一区二区三区不卡| 蜜桃人妻无码av天堂三区| 最近手机中文字幕高清大全|